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圖示 JY99-IIDN超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)
1、材料與設(shè)備
黃精:購于沈陽中街新藥特藥;循環(huán)水多用真空泵;HH一6數(shù)顯恒溫水浴鍋;光柵分光光度計(jì):山東高密彩虹分析儀器有限公司;電熱鼓風(fēng)恒溫干燥箱;JY99-IIDN超聲波細(xì)胞粉碎機(jī):寧波新芝生物科技股份有限公司。
2、實(shí)驗(yàn)方法
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用天平稱取研磨后的黃精碎片100g,80%的乙醇溶液80℃回流提取6h。提取后的黃精碎片于水浴鍋上烘干。
②超聲細(xì)胞粉碎儀提取黃精多糖
準(zhǔn)確稱取經(jīng)乙醇抽提后的黃精碎片30g,放于三角瓶中,加入8倍量的蒸餾水放入超聲細(xì)胞破碎儀中,調(diào)整工作時(shí)間最大為99s,間隔時(shí)間1s,工作次數(shù)36次。然后開始用超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)進(jìn)行超聲處理,并逐漸調(diào)節(jié)工作電壓至最大。超聲處理1 h取出,過濾。向?yàn)V液中再加入6倍量的蒸餾水,按同樣的工作參數(shù)進(jìn)行第二次超聲處理,40min后取出,合并兩次濾液。抽濾,除去雜質(zhì)后將濾液取出按l:l濃縮至30 mL。然后加入3倍量的乙醇進(jìn)行沉淀,靜置大約1h至上清液與沉淀出現(xiàn)明顯分層后抽濾,在抽濾過程中不斷加入無水乙醇,待所得樣品沉淀徹底干燥后取出。
3、精多糖含量的測(cè)定
采用苯酚一硫酸法測(cè)定黃精多糖的含量具體步驟如下:
準(zhǔn)確稱取葡萄糖4 mg,置于100 mL容量瓶中。然后分別精確吸取0.4、0.6、0.8 1.0、1.2、1.4、1.6、1.8 mL。加于標(biāo)號(hào)的試管中,各以蒸餾水補(bǔ)至2.0 mL,然后加入6%苯酚1.0mL及濃硫酸5.0mL。靜置10min搖勻,室溫放置20min以后于490mm測(cè)光密度,以2.0mL水按同樣顯色操作為空白,橫坐標(biāo)為黃精多糖微克數(shù),縱坐標(biāo)為光密度值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
4、結(jié)論分析
用于各種動(dòng)植物細(xì)胞、病毒細(xì)胞、細(xì)菌、牙孢及組織超聲波破碎提取法利用超聲波其強(qiáng)大的空化效果和許多次級(jí)效應(yīng)如:機(jī)械震動(dòng),擊碎乳化,擴(kuò)散等可以擊碎細(xì)胞壁釋放物質(zhì),常用于各種動(dòng)植物細(xì)胞、病毒細(xì)胞、細(xì)菌、芽孢及組織的破碎。本研究采用超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)提取黃精多糖,獲得的多糖同水煎法、稀堿浸提法相比顏色淺,雜質(zhì)少,純度高,是提取黃精多糖的一種有效方法。
新芝生物專業(yè)研發(fā)生產(chǎn)超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)、超聲波清洗機(jī)和超聲波細(xì)胞破碎儀等各種科研實(shí)驗(yàn)儀器與工業(yè)化生產(chǎn)設(shè)備
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