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新芝生物組織研磨儀助力“非洲豬瘟”樣品處理

  八戒:猴哥救我!

  悟空:呆子,何事慌張!

  八戒:猴哥你沒聽說嗎!非洲豬瘟來了,一個被傳染,一窩都遭殃啊!我聽說遼寧、黑龍江、吉林、江西、福建、四川好多兄弟都已經(jīng)被撲殺了。

  悟空:呆子!那還不離我遠(yuǎn)點(diǎn)!

  問題一、什么是非洲豬瘟?

  非洲豬瘟(African Swine fever,ASF)是由非洲豬瘟病毒(African Swine fever virus,ASFV)感染家豬和各種野豬(不傳染人)引起一種急性、出血性、烈性傳染病。其特征是發(fā)病過程短,最急性和急性感染死亡率高達(dá)100%,且只能依靠實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測確診。

  2018年8月3日我國確診首例非洲豬瘟疫情。

  問題二、目前在中國的傳染范圍?

  自8月初我國首次發(fā)現(xiàn)非洲豬瘟以來,截至11月22日,全國有20個省份47個市(區(qū)、盟)發(fā)生73起家豬疫情、1起野豬疫情,累計(jì)撲殺生豬60萬頭。全國非洲豬瘟疫情呈現(xiàn)多點(diǎn)散發(fā)狀態(tài),但在各地動物疾控部門的積極行動下,疫情開始趨于平穩(wěn),總體防控有效。


  問題三、非洲豬瘟檢測的樣品處理方法介紹

  一、非洲豬瘟樣品處理

  1. 目的

  規(guī)范ASFV樣品和實(shí)驗(yàn)材料的處理程序,保證ASFV相關(guān)實(shí)驗(yàn)的順序開展和實(shí)驗(yàn)室的生物安全。

  2. 適用范圍

  適用于疑似ASFV臨床樣品的實(shí)驗(yàn)前的處理

  3. 程序

  3.1實(shí)驗(yàn)材料

  ASF的易感動物,主要為家豬、野豬和蜱,通常采集的樣品為家豬、野豬的血液樣品、組織樣品以及蜱三類。田間采集的樣品通常需要經(jīng)過簡單的預(yù)處理,才能進(jìn)行后續(xù)的檢測、診斷工作。

  血清:用于病毒核酸檢測、病毒抗原和抗體檢測。將采好的豬血的注射器或采血管在室溫下傾斜靜止2~4h(防止暴曬),或置于37℃溫箱內(nèi)1h,待大部分血清析出后,取出血清,必要時經(jīng)離心分離血清。(最低建議量5ml)。

  抗凝全血:用于病毒核酸檢測和病毒抗原檢測。

  采血前,在真空采血管或注射器內(nèi)按比例加入抗凝劑。采集血液,輕輕上下顛倒,使血液與抗凝劑充分混勻,防止血液凝固的同時避免溶血。也可以將血液放入裝有玻璃珠的滅菌瓶內(nèi),震蕩脫落纖維蛋白。必要時,可加入雙抗以抑制血源性或采血過程中可能出現(xiàn)的細(xì)菌污染。

  當(dāng)血樣用于病毒核酸檢測時,一般不用肝素而選用EDTA作為抗凝劑。(最低建議量1mL)。

  組織樣本:活體采集,采用扁桃體,用于臨床健康動物ASF監(jiān)測。

  尸體剖檢ASF發(fā)病動物或死亡動物經(jīng)解剖取材,包括:ASFV靶器官的采集:脾臟、淋巴結(jié)、腎臟、扁桃體。

  其他病變組織臟器的采集:采集具有明顯病變的肝臟、肺臟、心臟等組織器官,選取部位在病變和健康組織交界處。

  腐敗動物尸體的樣品采集:剖檢取股骨,將附著的肌肉和韌帶等全部剔除,采集骨髓。最低建議量5克。

  蜱的采集:蜱可進(jìn)行核酸檢測、抗原檢測和蜱的形態(tài)學(xué)鑒定,查找豬圈的墻邊、墻縫、木質(zhì)或瓦質(zhì)的屋頂,或挖掘豬圈地面均可能找到蜱,也可查看豬表皮,采集蜱。

  1-1樣品保存條件

樣品名稱 \ 溫度要求或條件

采集過程

運(yùn)輸及檢測過程
     (短時間保存)

長期保存

血 液

抗凝血

冷藏

冷藏

-70或者-196

血清

冷藏

冷藏

-70或者-196

肝血濾紙片

常溫

常溫

-

濾紙

冷藏或常溫

冷藏或常溫

冷藏或常溫

組 織

固定組織

常溫

常溫

常溫

組織觸片

常溫

常溫

-

新鮮組織

冷藏

冷藏或常溫
     (滅菌的組織保存液中保存)

-70或者-196

蜱蟲

活體

15~22

15~22

15~22(血飼)[9.19]

固定

常溫

常溫

常溫

速凍

-70或者-196

-70或者-196

                   -70或者-196

  注:用于病毒分離和病理學(xué)檢測的樣品禁止-20℃保存。

  3.2實(shí)驗(yàn)器材和試劑

  臺式高速冷凍離心機(jī)、組織研磨儀、水浴鍋、計(jì)時器、冰箱和移液器等。

  無菌的剪子、鑷子、鋼珠、2mLEP管、移液器吸頭(10μL,200μL、1000μL)等。

  其他試劑和耗材主要包括:0.01mol/L PBS(PH7.2)、0.8%NaOH、75%酒精棉球等。

  3.3樣品處理程序

  3.3.1血清及全血樣品處理

  取血清或全血樣品1mL于滅菌EP管里,保存?zhèn)溆?/p>

  3.3.2組織樣品處理

  適用于脾臟等組織樣品和蜱的處理。盡可能減少污染,每取一個組織塊或蜱,用火焰消毒剪鑷等取樣器械,組織塊應(yīng)分別放入滅菌容器內(nèi)并立即密封,做好標(biāo)記,注意防止組織間相互污染。

  3.3.2.1組織樣品的處理應(yīng)在二級生物安全柜中進(jìn)行,勿使液體濺到生物安全柜中。

  3.3.2.2將0.1-0.2g組織塊放入2mLEP管中,用剪刀剪成碎塊,加1-2mL0.01mol/L PBS(PH7.2),再加入1-2粒滅菌鋼珠,密封后,表面消毒備用。剩余樣品放回容器內(nèi),重新密封,表面消毒后保存-70℃冰箱。

  3.3.2.3組織樣品的破碎可以利用組織研磨儀在生物安全柜外操作,將樣品制成組織懸液。

  重磅推薦使用Scientz-48L冷凍型高通量組織研磨器!

  3.4病毒滅活

  病毒的滅活處理應(yīng)在二級生物安全柜中進(jìn)行,將處理好的血清、全血或者研磨破碎后的組織樣品連同EP管放入60℃水浴中,放置30min滅活。

  3.5使用后儀器處理

  剪刀、鑷子等均應(yīng)放入消毒缸進(jìn)行消毒,放入鐵飯盒內(nèi),并裝入密封袋內(nèi)進(jìn)行高壓滅菌處理。裝有組織樣品保存液的容器和盛有組織塊的離心管應(yīng)密封管口,表面消毒后放入密封袋中高壓滅菌。鋼珠、吸頭等廢棄物應(yīng)用0.8%NaOH浸泡30分鐘消毒后,置密封袋內(nèi)高壓滅菌。消毒殘液應(yīng)裝入密封容器內(nèi)高壓滅菌處理。

  3.6注意事項(xiàng)

  操作之前要確認(rèn)生物安全柜和實(shí)驗(yàn)室已進(jìn)行了徹底的衛(wèi)生消毒處理,防止樣品間交叉感染。


  二、非洲豬瘟病毒的核酸檢測可用實(shí)時熒光PCR配套相應(yīng)實(shí)際進(jìn)行,具體操作步驟以儀器生產(chǎn)公司指南為準(zhǔn)。

  問題四、病毒殺滅和防控方式

  非洲豬瘟病毒雖然在環(huán)境中比較穩(wěn)定,但在豬肉烹煮處理過程中較易失活,70℃-75℃>加熱30分鐘以上,病毒就會被殺滅,也就是說我們?nèi)粘E腼冞^程中只要把豬肉熟透(包括最中間部位溫度至少達(dá)到70℃以上),即使有病毒也會很快失去感染力并喪失活性。

新芝生物Scientz-48L冷凍型高通量組織研磨器介紹

  新芝生物推出的Scientz-48L冷凍型高通量組織研磨器具備以下特征:

  1.應(yīng)用場景多樣。可以對不同組織進(jìn)行干磨、濕磨、混合以及均質(zhì)化處理。

  2.實(shí)驗(yàn)效率高。能提高提取大通量樣品中核酸的效率和質(zhì)量。

  3.實(shí)驗(yàn)過程安全。研磨過程采用封閉式一次性離心管,有效地避免了樣品交叉污染。

  4.儀器穩(wěn)定性好。對同一組織樣品可設(shè)定相同的研磨程序,從而獲得相同的研磨效率,提高了實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性。

  5.研磨效果好。產(chǎn)品采用高效研磨球進(jìn)行研磨,相較于傳統(tǒng)研磨方式對樣品的研磨更為均勻、充分。

  目前,新芝生物Scientz-48L冷凍型高通量組織研磨器已助力沈陽、大連、朝陽、本溪、鞍山、錦州、葫蘆島等多地動物疾控中心用于非洲豬瘟檢測實(shí)驗(yàn)的樣品前處理。

  Scientz-48L冷凍型高通量組織研磨器高效、穩(wěn)定、安全的儀器特性很好地解決了檢測過程中檢測樣品數(shù)量多、實(shí)驗(yàn)一致性難以控制等問題,得到了廣大用戶的一致好評。

  產(chǎn)品用途

  1.適用于各種植物組織包括根、莖、葉、花、果、種子等樣品的研磨破碎;

  2.適用于各種動物組織包括大腦、心臟、肺、胃、肝臟、胸腺、腎臟、腸、淋巴結(jié)、肌肉、骨骼等樣品的研磨破碎;

  3.適用于真菌、細(xì)菌等樣品的研磨破碎;

  4.適用于食品、藥品成分分析檢測的研磨破碎;

  5.適用于易揮發(fā)樣品包括煤炭、油頁巖、蠟制品等樣品的研磨破碎;

  6.適用于塑料、聚合物包括PE、PS、紡織品、樹脂等樣品的研磨破碎。

  主要技術(shù)參數(shù)

  1.時間設(shè)定:1(秒)-9999(秒)

  2.頻率設(shè)定:10-70Hz,即振蕩300-2100次/min

  3.額定功率:180W

  4.夾具行程:34mm(垂直)

  5.溫度設(shè)置 : -20℃或者-30℃

  6.電磁鎖控制開門

  7.樣品容量:隨機(jī)標(biāo)配:鋁合金適配器5ml 12孔,2ml 48孔

  可選配:鋁合金適配器2ml24孔

  8.電源需求:220V單相交流,<2.5A

  新芝生物公司簡介

  寧波新芝生物科技股份有限公司(股票代碼:430685)始創(chuàng)于1989年,公司總部位于寧波市國家高新區(qū),注冊資金6102萬元,是全球知名的生物樣品處理設(shè)備提供商,也是國內(nèi)超聲波技術(shù)應(yīng)用探索的先行者。

  依托強(qiáng)大的科研技術(shù)實(shí)力,公司在超聲波、溫濕度、高低壓、超低溫等技術(shù)層面積累了豐厚的經(jīng)驗(yàn),并先后研究開發(fā)包括生物樣品前處理儀器、分子生物學(xué)儀器、實(shí)驗(yàn)室潔凈設(shè)備、冷凍干燥設(shè)備、工業(yè)防垢除垢設(shè)備、環(huán)保除藻防控設(shè)備在內(nèi)的多款產(chǎn)品。公司始終堅(jiān)持業(yè)界前沿的技術(shù)研究和應(yīng)用開發(fā),致力于為科研、教育、環(huán)保、醫(yī)療、制藥、石化、農(nóng)林、材料等領(lǐng)域客戶提供先進(jìn)的產(chǎn)品設(shè)備和行業(yè)解決方案。

  公司目前擁有寧波、杭州兩地四大研發(fā)中心,擁有高水平研發(fā)人員數(shù)十人,專利60余項(xiàng)。公司曾多次承擔(dān)國家科技部、發(fā)改委、衛(wèi)生部重大科研項(xiàng)目,是國家發(fā)改委高技術(shù)產(chǎn)業(yè)化示范工程中心、科學(xué)儀器產(chǎn)業(yè)化基地、寧波企業(yè)工程(技術(shù))中心。公司研制的高壓氣體基因槍一舉打破國外技術(shù)壟斷,填補(bǔ)國內(nèi)相關(guān)領(lǐng)域空白,榮獲浙江省科技進(jìn)步二等獎。

  公司高度重視品牌培育和市場開拓,為更好地服務(wù)客戶,公司在全國各地建有30余個辦事處,辦事處均配備銷售工程師和售后工程師,可隨時滿足客戶需求。全球超過15,000家實(shí)驗(yàn)室在使用新芝生物的產(chǎn)品,各類儀器設(shè)備市場保有量超過100,000臺套,產(chǎn)品遠(yuǎn)銷美、英、法、俄、日、韓等36個國家,公司年度銷售收入突破1億元人民幣,已經(jīng)成為國內(nèi)乃至全球知名的生物樣品制處理設(shè)備研制專家。

  新芝生物30年風(fēng)雨兼程,以新致心,將繼續(xù)致力于為各行業(yè)客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和貼心的服務(wù)!

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