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結(jié)核分枝桿菌耐藥性的產(chǎn)生及其引起的耐藥結(jié)核病的流行,已經(jīng)成為國(guó)內(nèi)外高度關(guān)注的嚴(yán)重影響結(jié)核病防治效果的問題。開展藥物敏感性試驗(yàn)和耐藥性監(jiān)測(cè),對(duì)了解結(jié)核分枝桿菌的耐藥狀況、指導(dǎo)臨床治療、以及研究耐藥發(fā)生機(jī)制、有效控制耐藥結(jié)核病的流行具有非常重要的意義。
體外抗菌藥物敏感性試驗(yàn)簡(jiǎn)稱藥敏試驗(yàn)(AST),是指在體外測(cè)定藥物抑菌或殺菌能力的試驗(yàn)。藥敏實(shí)驗(yàn)可以相對(duì)快速有效地檢測(cè)病原菌對(duì)各種抗菌藥的敏感性,其目的是了解病原微生物對(duì)各種抗生素的敏感程度,以指導(dǎo)臨床合理選用抗生素藥物的微生物學(xué)試驗(yàn)。
固體培養(yǎng)法這是目前結(jié)核病實(shí)驗(yàn)室常用的細(xì)菌學(xué)藥敏試驗(yàn)方法,包括比例法( method of proportion,MOP) 和絕對(duì)濃度法,分別由法國(guó)學(xué)者G.Canetti 和德國(guó)學(xué)者G.Meissner 于1963 年首先提出。比例法是世界衛(wèi)生組織推薦的藥敏試驗(yàn)方法,也是目前我國(guó)流行病學(xué)監(jiān)測(cè)和耐多藥結(jié)核病規(guī)劃管理項(xiàng)目所采取的方法。比例法是將結(jié)核分枝桿菌菌液稀釋成不同的濃度,接種在相同濃度的含藥羅氏培養(yǎng)基上,通過計(jì)算耐藥菌的比例,來(lái)判斷細(xì)菌是否耐藥。
在我國(guó),各省、直轄市、自治區(qū)疾病預(yù)防控制中心及胸科/傳染病醫(yī)院是開展結(jié)核病研究和藥敏試驗(yàn)的主要單位。收集培養(yǎng)的結(jié)核桿菌樣本,要進(jìn)行后續(xù)的藥敏試驗(yàn),細(xì)菌樣品的分散尤為關(guān)鍵。傳統(tǒng)方法通常是通過挑取培養(yǎng)的細(xì)菌進(jìn)行研磨分散,反復(fù)加液比濁,直至將所有的樣本均調(diào)節(jié)到同一麥?zhǔn)蠞岫?,然后進(jìn)行后續(xù)的藥敏試驗(yàn)。
超聲細(xì)菌分散計(jì)數(shù)儀是一款基于超聲分散和光電濁度檢測(cè)原理的菌液前處理儀器。該儀器與傳統(tǒng)的手工分散方法相比,它能更快更好地實(shí)現(xiàn)菌落分散和濁度檢測(cè)一體化,同時(shí)智能提示稀釋到標(biāo)準(zhǔn)麥?zhǔn)蠞岫染鷳乙核璧南♂岓w積。是一款高效率解放雙手的同時(shí)還不影響菌株活性和藥敏試驗(yàn)結(jié)果的智能儀器,在微生物實(shí)驗(yàn)前處理中具有較高的應(yīng)用價(jià)值。
通過壓電陶瓷換能器將高頻電能轉(zhuǎn)化為超聲波聲能,由超聲波擊錘將超聲波聲能傳遞到比色皿,在不損傷樣品的前提下,實(shí)現(xiàn)比色皿中成團(tuán)細(xì)菌的超聲波均勻分散,然后光源產(chǎn)生的光線透過比色皿照在傳感器上,通過傳感器讀取透射光的強(qiáng)度,將樣品與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)對(duì)比,實(shí)現(xiàn)樣品麥?zhǔn)蠞岫葴y(cè)量,并基于樣品麥?zhǔn)蠞岫群退惴ńo出稀釋到目標(biāo)濁度所需加液體積,并對(duì)樣品菌落數(shù)進(jìn)行初步估計(jì)。
序號(hào) | 超聲分散 | 研磨瓶分散 |
1 | 參數(shù)設(shè)置(0.5min) | / |
2 | 細(xì)菌挑?。?min) | 細(xì)菌挑?。?min) |
3 | 超聲分散、比濁(1-3min) | 漩渦震蕩、研磨(1-2min) |
4 | 菌液靜置,轉(zhuǎn)移到比濁管(15min) | |
5 | 添加生理鹽水比濁(2min) | |
6 | 根據(jù)稀釋體積提示添加生理鹽水(0.5min),制備出標(biāo)準(zhǔn)濁度菌懸液 | 反復(fù)加液,比濁(2-5min),制備出標(biāo)準(zhǔn)濁度菌懸液 |
總耗時(shí) | 3-5min | 23-27min |
1. 水處理、固液分散、溶液中顆粒的解團(tuán)聚實(shí)驗(yàn);
2. 分枝桿菌、腸桿菌、葡萄球菌等微生物藥敏試驗(yàn)的菌懸液制備;
3. 生物制品研發(fā)及細(xì)菌培養(yǎng)分散及濁度檢測(cè)實(shí)驗(yàn);
4. 食品微生物限度等檢測(cè)實(shí)驗(yàn)。
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參考文獻(xiàn):
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新芝生物專業(yè)研發(fā)生產(chǎn)超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)、超聲波清洗機(jī)和超聲波細(xì)胞破碎儀等各種科研實(shí)驗(yàn)儀器與工業(yè)化生產(chǎn)設(shè)備
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